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安捷倫1260液相色譜 操作流程

更新時間:2024-07-26      點擊次數(shù):22719

安捷倫1260液相色譜 工作站的詳細操作方法


一、開機:

1、打開電腦;

2、打開液相色譜各個模塊的電源;

3、雙擊桌面“LC1260(Online)",進入聯(lián)機界面;

二、排氣:

1、手動旋開泵處沖洗閥(逆時針旋轉(zhuǎn)約1圈)

2、右鍵單擊“Pump"圖標(biāo)銷售,選擇“Method"選項,進入泵編輯畫面,設(shè)流速:5ml/min,點擊“確定";

3、右鍵單擊“Pump" 圖標(biāo)銷售,點擊“Control"選項,選中“ON",點擊“確定",則系統(tǒng)開始沖洗,直到

管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止(一般為5分鐘),切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道

無氣泡為止;

4、右鍵單擊“Pump" 圖標(biāo),點擊“Method"選項,設(shè)流速:0ml/min,手動旋緊沖洗閥;

5、右鍵單擊“Pump"圖標(biāo),點擊“Method"選項,按照方法要求選擇合適比例的流動相,設(shè)流速:1.0ml/min;(不一定是1);

6、同理右鍵單擊“Column Comp",“DAD"圖標(biāo),點擊“Method"選項,按照;

7、方法的要求設(shè)置溫度,波長,點擊“控制" 選項,“ON"打開柱溫箱和檢測器;

三、編輯方法:

1、點擊“Method"—— “Edit EntireMethod"開始編輯完整方法;

2、選中除“Data Analysis "外的三項,進入下一選項卡,選擇“Als"(自動進樣),點擊“OK",進入下一選項;

3、選擇“Method"菜單下“Method Information"選項,在“Method Comments"中加入方法的信息(如:

This is for test!),選擇“OK",進入下一選項;

4、泵參數(shù)設(shè)定:右鍵單擊“Pump"圖標(biāo),點擊“Method…"選項,設(shè)置“Flow":如1.0ml/min;“Stop

Time":如10 min(該停止時間僅為做一個樣品需要的時間),按照要求選擇合適比例的流動相配

比,選擇“OK",進入下一選項;

5、自動進樣器參數(shù)設(shè)定:右鍵單擊“Sampler"圖標(biāo),點擊“Method"選項,選擇“Injection volume",輸

入進樣體積,選擇“OK",進入下一選項;

6、柱溫箱參數(shù)設(shè)定:右鍵單擊“Column Comp",點擊“Method"選項,設(shè)置“Left"溫度(可設(shè)置溫度范

圍:低于室溫10℃-80℃),一般“Left"和“Right"溫度一致,選擇“Combined"綁定即可,“Stop

Time"選擇“As Pump /Injector",選擇“OK",進入下一選項;

7、UV檢測器參數(shù)設(shè)定: 右擊“DAD" ,點擊“Method…"選項,下方的空白處輸入所需的檢測波長(可

根據(jù)需要選擇多個波長,多可選8個波長);“Stop Time"選擇“As Pump /Injector";“Spectrum"

——“Store"選項下,根據(jù)需要選擇 “None"或“All(全波長掃描)"等選項,選擇“OK",進入下一選

項;

8、編輯方法完畢,從“Method"菜單中,選中“Save Method As",輸入一方法名,選擇“OK",保存方

法成功。

9、單針進樣

10、從“Run Control"菜單中,選擇“Sample Information"選項,輸入“Operator Name";在“Data File"中

選擇“Path"和 “Prefix/Counter(文件命名)"設(shè)置“Prefix(一般設(shè)置為年月日)"和“Counter";輸

入“Location(樣品位置)"和“Sample Name",選擇“OK",進入下一選項;

11、基線平穩(wěn)后選擇“Run Control"中的“Run Method"選項,開始進樣。

四、序列進樣:

1、選擇“Sequence"菜單下“ Sequence Table"選項,在“Confiqure Table"中選擇需要選項,一般

為“Vial(樣品瓶)",“Sample Name(樣品名稱)",“Method Name(方法名稱)",“Inj/Vial(進樣次

數(shù))",“Sample Type(樣品類型)",“Datafile(文件名)"和“Inj Volume(進樣體積)";

2、點擊“Inset"生成一行,設(shè)置上述參數(shù),選中該行,點擊“Copy"和“Paste"復(fù)制后修改相應(yīng)參數(shù),即

生成序列表,選擇“OK",進入下一選項;

3、點擊“Sequence"菜單下“ Sequence Parameters"選項,選擇序列數(shù)據(jù)的“Path"(序列會自動生成

以“序列名稱-時間"為名稱的文件夾保存數(shù)據(jù)),數(shù)據(jù)建議選擇 “Prefix/Counter"保存;

在“Shutdown"選項下選中“Post-Sequence Command/Macro",根據(jù)需要選擇“PUMPALL OFF(序列

結(jié)束后關(guān)閉泵)"" “LAMPALL OFF(序列結(jié)束后關(guān)閉紫外燈)"" “STANDBY(序列結(jié)束后關(guān)閉紫外燈

和泵)",選擇“OK",進入下一選項;(注:若“Path"中默認保存于C盤,則可點擊“View",選

擇“Preferences",根據(jù)需要添加相應(yīng)的“SequenceTemplates"“Data"“Master Methods"保存路徑)

4、從“Sequence"菜單,選中“Save Sequence Template As",輸入一序列名,選擇“OK",即可;

5、基線平穩(wěn)后選擇“Run Control"中的“Run Sequence"選項,開始序列進樣。

(注:若中途停止運行,則選擇“Run Control"中的“Stop Run/Inject/ Sequence"可保留圖譜信息,若選

擇Abort,則所有圖譜信息都丟失)

五、數(shù)據(jù)分析(脫機狀態(tài)使用):

1、雙擊“LC1260(Offline)"圖標(biāo)進入的脫機畫面

2、從“View"菜單中,點擊“Data Analysis"進入數(shù)據(jù)分析畫面

3、從“File"菜單選擇“Load Signal",選中所需的數(shù)據(jù)文件名,點擊“OK",則數(shù)據(jù)被調(diào)出。

4、譜圖優(yōu)化:從“Graphics"菜單中選擇“Signal Options"。從“范圍" 中選擇“Full"或“Use Ranges" 選擇

所需“Time Range"和“Response Range",選擇“OK";從“Integration"中選擇“Integration Events",調(diào)

整“Area Reject"和“Height Reject"刪除雜峰;點擊“Set Integration"圖標(biāo),可選擇性消除不需要的積

分,若想消除該操作,則選擇“Method Manual Events"上排左起第5個圖標(biāo)進行移除操作即可,點擊

左邊“√"圖標(biāo),將積分參數(shù)存入方法并退出“Integration Events"。

(注:“Set Integration"圖標(biāo)為)

六、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:

1、選擇“Calibration"菜單下“New Calibration Table",選擇“Automatic Setup"中“Level(即標(biāo)曲中對應(yīng)

的點,個點即為1)"和“Defanlt Amount(標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)點的濃度)",選擇“OK";

2、通過選擇“Calibration"菜單下的“Add Level"選項依次添加各點參數(shù),若為外標(biāo)法,在“ISTD"項下

選“NO",若為內(nèi)標(biāo)法則選“Yes";“#"項下對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)無的數(shù)字的應(yīng)統(tǒng)一;若想更改標(biāo)準(zhǔn)曲線中

的對應(yīng)點;

3、選擇“Calibration"菜單下的“Recalibrate"項的“Mode"選項,選擇“Average"則表示取當(dāng)前點與標(biāo)曲

中對應(yīng)點的平均值替代標(biāo)曲中原對應(yīng)點,若選擇“Replace"則表示將當(dāng)前點取代標(biāo)曲中對應(yīng)點;

(注:修改“Defanlt Amount"中濃度單位的方法:選擇“Calibration"項下“Calibration Setting",修

改“Amount Units",設(shè)置濃度單位;選擇“Calibration"項下“Calibration Setting",修改“Default

CalibrationCurve",選擇合適的曲線類型-Type,是否過原點-Origin和各點對于標(biāo)準(zhǔn)曲線的比重-

Weight,通常選Equal)

4、調(diào)出樣品譜圖,點擊需要計算濃度的色譜峰,選擇“Report" 菜單中的“Specify Report",選

擇“Report style"為“Detail",點擊“OK"后選擇“打印預(yù)覽"圖標(biāo),在報告中即可體現(xiàn)計算結(jié)果。

七、 圖譜重疊設(shè)置:

1、選擇“File"菜單下“Overlay Signal"選項,選擇任意需要重疊的圖譜;

2、在“Signal"選項下,選擇“3D Signal Overlay"圖標(biāo)(緊鄰圖譜上方左起第四個圖標(biāo)),在彈出

的“Adjust Signal OverlayOptions"對話框中調(diào)節(jié)交錯時間和高度;若想移除重疊譜圖,點擊第六個圖

標(biāo)。

八、信噪比等參數(shù)計算:

1、選擇“Report"菜單中的“System Suitability"項下的“Edit Noise Range"選項,設(shè)置時間范圍(超過

1min);

2、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report",選擇“Report style"為“Perfomance+Noise",點

擊“OK"后,即可預(yù)覽信噪比參數(shù);

3、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report",選擇“Report style"為“Extended Perfomance",點

擊“OK"后,即可預(yù)覽對稱性、拖尾因子等所有參數(shù)。

九、程序運行時檢測出峰情況:

選擇“File"菜單下的“Snapshot"選項即可。

十、打印報告:

1、從“Report"菜單中選擇“Report Mode",選擇“Use Classic Reporting";

2、從“Report"菜單中選擇“打印報告",則報告結(jié)果將被打印。

十一、關(guān)機:

1、沖洗色譜柱和系統(tǒng)后,退出化學(xué)工作站及其它窗口,關(guān)閉計算機;

2、關(guān)閉Agilent 1260各模塊電源開關(guān)。


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